基因工程靶向细胞疗法

本文主要讲的是基因工程靶向细胞疗法的文章，基因工程靶向细胞疗法也称为生物免疫疗法中的细胞治疗技术，是国际公认的最具应用前景的治疗技术之一。主要利用dna重组技术，将目的基因与载体dna在体外进行重组，然后把这种重组dna分子引入受体细胞，并使之增殖和表达的技术。目前国际上基因工程疗法成为研究的热点，均处于研究阶段，临床上案列较少。借着行业发展的热潮，基因检测公司在市场的表现力也一直很好，给用户带来很多全新的优质体验。
基因工程靶向细胞疗法
将一种生物的dna中的某个遗传密码片段连接到另外一种生物的dna链上去，将dna重新组织一下，就可以按照人类的愿望，设计出新的遗传物质并创造出新的生物类型，这基因工程一般包括四个步骤：
取得符合人们要求的dna片段，这种dna片段被称为目的基因；
构建基因的表达载体；
将目的基因导入受体细胞；
目的基因的检测与鉴定。
取得符合人们要求的dna片段
要把目的基因从供体dna长链准确地剪切下来，可不是一件容易的事。1968年，沃纳阿尔伯、丹尼尔内森斯和汉弥尔顿史密斯第一次从大肠杆菌中提取出了限制性内切酶，它能够在dna上寻找特定的切点，认准后将dna分子的双链交错地切断。人们把这种限制性内切酶称为分子剪刀。这种分子剪刀可以完整地切下个别基因。自1970年代以来，人们已经分离提取了400多种分子剪刀。有了形形色色的分子剪刀，人们就可以随心所欲地进行dna分子长链的切割了。
构建基因表达载体
dna的分子链被切开后，还得缝接起来以完成基因的拼接。1967年，科学家们在5个实验室里几乎同时发现并提取出一种酶，这种酶可以将两个dna片段连接起来，修复好dna链的断裂口。1974年以后，科学界正式肯定了这一发现，并把这种酶叫作dna连接酶。从此，dna连接酶就成了名符其实的缝合基因的分子针线。只要在用同一种分子剪刀剪切的两种dna碎片中加上分子针线，就会把两种dna片段重新连接起来。
将目的基因导入受体细胞
把拼接好的dna分子运送到受体细胞中去，必须寻找一种分子小、能自由进出细胞，而且在装载了外来的dna片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒，因为质粒能自由进出细菌细胞，应当用分子剪刀把它切开，再给它安装上一段外来的dna片段后，它依然如故地能自我复制。此方法适用于植物细胞的基因工程。此外，将目的基因导入动物细胞可选用显微注射法，导入微生物细胞可以使用钙离子（如氯化钙）处理细胞使其可以吸收外界的dna分子。
目的基因的检测与鉴定
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是检测基因工程是否成功的一步。
首先，要检测转基因生物染色体的dna上是否插入了目的基因。方法是采用dna分子杂交技术，即将转基因生物的基因组dna提取出来，在含有目的基因的dna片段上用放射性同位素等做标记，以此作为探针，使探针与基因组dna杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体dna中。该方法因发现者而命名为southern印记。
其次，还需要检测目的基因是否转录出了mrna，检测方法同样是分子杂交技术，与上述方法不同的是需从转基因生物中提取mrna，做上标记以进行检测。由于southern印记名称的缘故，所以该方法被称为northern印记。
最后，检测目的基因是否翻译成蛋白质。方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已经形成蛋白质产品。该方法又成为western印记。
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