克隆PCR产物的最优条件是什么?

克隆pcr产物的最优条件是什么?如果能实践这几点,高电位治疗仪定能独树一帜,成为行业的佼佼者,并不断的前行着。
最佳插入片段载体比需实验确定
(插入片段载体)常为最佳比,摩尔数比或也行
应测定比值范围
连接用 x连接液,质粒dna,w单位的t连接酶,插入片段共
室温保温小时,或℃过夜
在这种温度下,缺t-凸出端的载体会自连,产生蓝斑
室温保温小时能满足大多数克隆要求,为提高连接效率,需℃过夜
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产物的电泳检测时间
出现假阴性,不出现扩增条带
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出现非特异性扩增带
扩增出现片状拖带或涂抹带
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