ecotilling （ecotype targeting induced local lesions in genomes）可快速检测自然群体中的snp（single nucleotide polymorphism）等dna变异。第一次建立了简化的茶树ecotilling技术体系：首先筛选扩增目的基因的特异pcr引物；然后通过celi酶切pcr产物优化实验，确定酶切时间20min、10×buffer组成为250mmol／l tris-hci（ph7．4）、150mmol／lkci、15mmol／lmgso4、4lag／mlbsa和0．04％triton x-100，反应温度为47．5℃，酶量为1．8μl cje（celery juice extract）／10μl反应体系时，酶切的谱带信号较强、特异性高；初步确定合适的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测条件为凝胶浓度5％、上样量4～5μl、有效分离长度要达到15cm。利用上述简化的ecotilling对6份茶树种质870bp的ppo基因片段实现了分型，经测序验证酶切产生的谱带与6份种质内部或不同种质间的snp位置吻合。完成机构：中国农业科学院茶叶研究所茶树资源与改良研究中心／国家茶树改良中心,浙江杭州310008