y氰基t酷（gaba）广泛存在干动植物体内，是一种
中枢神经系统的抑制性神经递质，具有降低血压、增强脑细
胞代谢、促进长期记忆等生理活性作用1“：谷氨酸脱箍酶
（gadl可以专一地催化卜谷氨酸脱揎转变成gaba。据报道，
茶叶具有较高的6adib力“1。据中国农业科学院茶叶研究所
研究，茶叶中6ad活性因品种不同而有所差异，从而导致不
同品种茶叶中gaba含量不同“1。但目前针对不同品种茶树
中gaba舍量和gad活性之间关系而展开的相关研究报道较
少。gadit力的测定方法有两条途径：【1）测定co,的生成：
（2）irtgaba的定量测定。其中对gaba的定量测定由于其方
便性和准确性，成为gad活力测定的首选方法。gaba的测
定主要有酶法、色质联用法、柱层析荧光测定法、毛细管电
泳法、毛细管气相色谱法、高效液相色i法、氨基酸自动分
析仪及电泳法等...，但这些方法大多用于医学领域，且价格
昂贵，f适于大量的定量分析。为此，本研究以13份不同茶
树品种为对象，采用纸层析法定量测定，探讨各品种茶叶中
gaba含量和gadi舌性差异，同时基于gad,zit差异对各品
种进行聚类分析，旨在筛选特异性茶树品种，为gaba茶的
生产提供科学依据。
1材料与方法
i.i实验材料
1.1 1 #tj式茶叶实验所用的13个茶树品种茶树鲜叶采自
华南农业大学实验茶园，采摘标准为一芽二叶、
1 1 2主要试剂y，氯基丁醢标准品、备氨酸标准品、茚
三酮、正丁醇、泳乙醇、硫酸铜、乙醇、磷酸缓冲液、口巯
基乙醇，以上试剂均为市购。
11 3主要仪器
层析缸、移液棺：购自广州市精科化学仪器有限公司
ab204-n型电子天平：上海梅特勒-托利多仪器有限公司
dk-8d电擤恒温水浴锅：北京市永光明医疗仪器厂
re-52a旋转蒸发器：上海亚荣生化仪器厂
shz-d（ⅲ）循环水式真空泵：巩义市予华仪器有限责
任公司
cr22gii高速冷冻离心机：日本日立公司
uv-2800紫外分光光度计：上海龙尼柯仪器有限公司
雷磁口h计：上海精科仪器公司
dhg-101电热恒温干燥箱：江苏吴江市新俺隔烘
箱制造厂
1 2蜜验方法
1.2.1 gabamli定
1 211样品处理
分别称取备品种鲜叶、真空处理3h后的茶叶各
10g.碾磨后迅速加入100ml沸水浸提ih后抽滤。旋
转蒸发一定时间后加70%2醇静置30min，置于离心
机中，以sooor/min离心5min.上清液即为gaba提取
液。
1 2 1 2纸层析法测定茶叶#gaba含量
采用国产新华3号滤纸，吸取8 yl#品，点样线距
滤纸边缘2.5cm，样品间距2.ocm。将点样后的滤纸条
放在装有展开剂的层析缸中层析。用喷雾法向层析纸
均匀喷i290.4%茚三酮，于电热恒温千燥箱中90。c烘10
miri.将与标准品位置一致的斑点剪下，用v（lg/l硫
酸铜）v（体积分数750h乙醇）=2：38的洗脱液洗脱。
520 nm处比色测定。根据张晖等的方法计算gaba的含
量...
1 2 2鲜叶中gad活性测定
称取i.og茶叶鲜叶。研磨成均浆，在4c条件下
加入10ml、ph5.8的磷酸缓冲液和30pip巯基乙醇，
转人离心管，置于离心机内在4口c、13000r/min的条
件下离心10min.上清液即为粗酶提取液。取1mi底物
溶液（i%glu, ph 5.8）与iml粗酶液于40c的水浴中反
应2h后，转入沸水中煮i弗5min，离心得上清液。用纸
层析法测定gaba的生成量，以每30min生成1umoi的
gaba作勾6ad的1个酶活单位...
2结果与分析
21展开舸的垃择
关于纸层析法定量测定氨基醅，不同研究者使
用了不同的展开剂与配比，但针对gaba分离的报道
较少。本文选择了3种展开剂配方。即v（正丁醇）
：v（球乙醛）v（水）=7 3=1.v（正丁醇）：v（冰乙
酷）iv（水）=4:3：1和v（正丁醇）v（冰乙酷）v
（水）=41 1.其中，用展开剂v（正丁醇）v（冰乙
醢）iv（木）=7:3：1的分离效果不理想，而展开剂v
（正丁醇）：v【冰乙醚）：v（水）=4：1 1虽然分离效果
2 2自然条件下不同茶树品种gaba含量丑gad
目性分析
不同茶树品种鲜叶的gaba含量及gad活性的测定
☆果见表1茶树中6aba含量殛6ad活性固品种不同
i异，在所选13个茶树品种中，福云六号鲜叶的gaba
}量高于其他品种，为5 44mg/g.而黄枝香鲜叶gad
i性最高，为2.049pmol/30min.对所选品种鲜叶的
;aba含量和gad活性进行显着性方差分析可知鲜叶
jaba含量和gad活性均呈极显着差异（f> fom）。
2 3聚类分析
基于6ad活性的差异对1 3个茶榭品种鲜叶进行聚类分
析，得到聚类分析图（囤2）。当相似系数为0 1 3时，13个
品种划被分为3大类群（见表3）。其中，第1类包括3个pti
种，此类品种gad活性均较高，均值为1.981 ymol/30min;
第ii类包括2个品种，具有较高的gad活性，均值为
1.231“mol/30min;第川类包fs8个品种，此类品种中gad
活性较低，均值，j0.653 pmol/30min。
从聚粪分析结果发现，第1娄茶树品种都为大叶种：第
ii类的2个茶树品种中，枝兰香为大叶种，福云六号为福鼎大
白茶和云南大叶种的杂交。gad的活性虽不及第1类，但也
较高。而第...类茶树品种为中小叶种，gadi活性均较低因
此，不同茶树品种间，大叶种茶树的gad活性一般高于中小
叶种的。
3小结和讨论
茶树中gaba含量和6ad活性受多方面因素的影响，其
中品种基因型起着决定作用。本研究结果表明，不同茶树
品种间6aba含量和gad活性存在明显差异，鲜叶6aba含
量、真空3h处理后的6aba含量和6adi活性均呈极显着差异
{f> fo0 1）。13个茶树品种可分为3粪，其中第1类包括3个大
叶种，其6adi活性均较高，均值为1.981 ymol/30min;第ii
类次之：第...类包括8个中小叶种，此类品种中gad活性均j
较低。由于茶叶中gad活性和gaba舍量密切相关，因此，
gadi活性高的品种6aba富集能力亦强。从本研究可发现，
从大叶种茶树品种中更易筛选出高gadi活性茶ih品种，从而
为富gabaiij能性茶叶生产提供了品种选择依据。
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