花卉化学诱变育种及其应用

摘自:互联网
摘要:通过综述化学诱变育种发展历程、诱变剂种类、诱变机理、育种特点及应用等五方面的内容,阐述了国内外花卉化学诱变育种五方面的应用概况,指出了花卉化学诱变育种存在五方面的问题,同时展望了七方面的利用优势
关键词:花卉;化学诱变育种;诱变剂;应用
花卉化学诱变育种是人工利用化学诱变剂诱发花卉产生遗传变异,再通过多世代对突变体进行选择和鉴定,培育成具有较高观赏价值的花卉新品种的技术,通过此技术运用可达到培育新品种的目的。
1化学诱变育种简述
1.1化学诱变育种的发展历程
化学诱变育种始于20世纪初。1943年ochlkers用脲烷处理月见草以后,化学药剂的诱变作用得到了肯定。gustafsson等于1948年用芥子气处理大麦获得突变体,开创了化学诱变在农作物育种上应用的先河。50年代的研究较为广泛并逐渐取得成果,此后农作物化学诱变育种在世界各国得以推广。到1990年为止,利用化学诱变育种育成的新品种(系)有106个,约占诱变育成品种(系)的70%,以禾谷类居多,其中大麦15个,水稻12个,小麦9个,玉米7个[1]。
我国化学诱变育种起步于20世纪50年代后期,经过40年发展取得了令世人瞩目的成就,诱变育成的品种数量和种植面积居世界首位。据不完全统计,至1994年底,我国已在40多种植物上育成了430多个优良突变品种,年种植面积900万hm2以上,增产粮棉、油50亿公斤,创造了巨大的社会效益和经济效益[2]。
1.2化学诱变剂种类
化学诱变剂早年常用芥子气,到现在新的诱变剂不断被发现和应用,约300多种,有特殊诱变效果的30余种,主要有下列几类[3]:
1.2.1烷化剂类:如甲基磺酸乙脂(ems)、乙基磺酸乙脂(ees)、甲基磺酸甲脂(mms)、丙基磺酸丙脂(pps)、甲基磺酸丙脂(pms)等。
1.2.2核酸碱基类似物:5-溴尿嘧啶(5-bu)、5-溴去氧尿嘧啶核苷(5-budr),8-氮鸟嘌呤、咖啡碱、马来酰肼等。
1.2.3吖啶类(嵌入剂):吖啶橙、二氨基吖啶、人工合成icr化合物。
1.2.4无机类化合物:h2o2、licl、亚硝酸、mncl2、cuso4等。
1.2.5简单有机类化合物:抗生素、丝裂霉素、重氮丝氨酸、中性红、甲醛、乳酸等。
1.2.6异种dna:嘌呤及其衍生物等。
1.2.7生物碱:石蒜碱、秋水仙碱、喜树碱、长春花碱等。
1.3化学诱变机理
1.3.1碱基与突变
dna结构中有4种碱基,即腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶,一般腺嘌呤与胸腺嘧啶配对,鸟嘌呤与胞嘧啶配对。如碱基系列中一个碱基被另一个碱基对所代替,叫做碱基替换,以嘌呤替代嘌呤或嘧啶替代嘧啶的替换过程称替换。如嘌呤替代嘧啶或嘧啶替代嘌呤称颠换。碱基替换过程中只改变替换碱基的那个密码子,也就是说每一次碱基替换只改变一个密码子,不会涉及到其它密码子。如在碱基系列中插入一个新的碱基或在碱基系列中丢失一个碱基,造成后面的整个dan上的密码子都被改变称移码突变[3]。
一般来说,单个植株发生突变的频率介于千分之一至万分之一之间。单个基因则介于十万分之一至百万分之一之间,然而人工诱变可使自然突变提高千倍以上,从而使人们定向地创造和筛选变异成为可能[2]。
1.3.2碱基类似物的诱变机制
碱基类似物是一些非标准的核酸碱基,它们的分子结构与天然碱基非常相似,它可在dan复制中替代天然碱基,引起配对错误,从而由一种碱基对替换另一种碱基对。如2—氨基嘌呤(2ap),它主要置换腺嘌呤,从而引起a-t到g-c的转换。
1.3.3化学物质诱变机制
一些烷化基、亚硝酸盐及羟胺都能改变核酸中的核苷酸的化学结构,导致碱基的替换。
1.3.3.1亚硝酸具有氧化脱氨的作用,它能使腺嘌呤脱去氨基成为次黄嘌呤。次黄嘌呤不能与胸腺嘧啶配对,却能与胞嘧啶配对,这样受亚硝酸处理的dna分子中就具有次黄嘌呤,经过dna复制,使原来的a-t对转换成g-c对。
1.3.3.2烷化基能使dna分子中的碱基烷基化,导致配对时出现误差,产生碱基替换。如甲基磺酸乙脂(ems)主要与鸟嘌呤作用,嘌呤环的n-7上接上烷基,造成g-c向a-t的转换或t-a向c-g的颠换。
1.3.3.3羟胺(ha):是一种还原剂,作用胞嘧啶上,使它的氨基变成醇基,不再与鸟嘌呤配对,因此在dna复制时,能将g-c对转换成a-t对。
1.3.4嵌入剂:是一类能引起移码突变的化合物,常用的有吖啶橙、二氨基吖啶(原黄素和吖啶黄素等吖啶衍生物)。它们都是扁平的三环化合物,大小和嘌呤-嘧啶对大致相等,它能结合到dna上,并插入邻近的碱基之间,使dna骨架变形,导致染色体配对交换过程中不等价交换,形成两个重组分子,一个多一个碱基对,另一个少一个碱基对,造成识别和阅读错误产生移码突变。吖啶类物质诱发的移码突变只能由吖啶剂诱发回复[3]。
1.3.5关于控制遗传可能性。目前已知突变对所研究的作物的作用同下述遗传背景有关:不同基因复制的非同步性与某些诱变剂作用先于dna合成;病毒及游离体的相互作用与染色体某些部位有关;在控制因子作用下的基因变异的特异性与副突变;特殊的抗突变系统;基因易位、抑制某些基因的机能与操纵子;二倍体及单倍体选择等等[4-5]。
1.4化学诱变育种的特点[3]
1.4.1操作方法简便易行。与辐射诱变相比价格低廉,不需昂贵的x光机或γ射线源,只要有足够的供试材料,便可大规模进行,并可重复试验。
1.4.2专一性强。特定的化学药剂,仅对某个碱基或几个碱基有作用,因此可改变某品种单一不良性状,而保持其它优良性状不变。
1.4.3化学诱变剂可提高突变频率,扩大突变范围:化学诱变可诱变出自然界往往没有或很少出现的新类型,这就为人工选育新品种提高了丰富的原始材料。
1.4.4化学诱变剂是靠其化学特性与遗传物质发生一系列生化反应造成的,多基因点突变,且有迟发效应,在诱变当代往往不表现,在诱导植物的后代,才表现出性状的改变。因此,至少需要经过两代的培育、选择,才能获得性状稳定的新品种。
1.4.5诱变后代的稳定过程较短,可缩短育种年限:经过化学诱变剂处理后,用种子繁殖的一二年生草花,一般f3代就可稳定,经3~6代即可培育出新品种。天然异花授粉或常异交植物,应注意防止种间或品种间天然杂交引起后代分离。对木本、宿根花卉和能用无性繁殖的植物,应采用营养繁殖以保持其品种特性。
2化学诱变在花卉育种上的应用
花卉的化学诱变育种主要是利用秋水仙素诱导多倍体的产生,从而产生新品种。多倍体花卉新品种往往具有植株粗壮、叶大、花器官增大、花色更娇艳等特征,增加了花卉的观赏价值和商业价值,这在百合、萱草、金鱼草、马蹄莲、报春花等众多花卉上均获成功。
2.1国外花卉化学诱变育种研究及应用概况
到1937年,美国布勒克斯里(blakeslee)与艾鸟芮(avery)二人应用秋水仙碱处理植物的种子,一举获得了45%以上的同源多倍体。有用ems2.5%诱导麝香石竹的花色突变,1978年美国人用ems4%处理紫薇一小时,获得叶小而厚、花小、茎粗壮,抗白粉病耐干旱的突变体[3]。乌克兰人用0.01%n—乙基—n—亚硝基脲处理夹竹桃植物,诱导出晚花,有特异花色的突变体,用0.02%n—乙基—n—亚硝基脲及氨基苯酸处理菊花,得到二株白色突变体,还实现了五个玫瑰品种的花色改变。kashikar以二倍体矮牵牛的白花品系为材料,用甲烷乙磺酸盐(ems)和r射线处理,使其花色发生突变,从中选育新花色的矮牵牛品种[6]。mazumder和bhowmik用γ射线和ems对紫花苞舌兰(spathoglottisplicata)的原球茎进行处理获得了8个叶绿素的突变体。在高浓度的激素作用下,万代兰属花色发生变异,蕙兰属花瓣变厚,蝴蝶兰属整个植株发生变异[7]。hansen等(1996)用125nag/l秋水仙素处理五唇兰(doritispulcherrimalind1.)的原球茎,再生植株中有46%为四倍体。
2.2我国花卉化学诱变育种研究及应用概况
我国花卉的化学诱变育种起步晚,目前已培育出多倍体重瓣大岩桐[8]。武汉植物所通过染色体加倍诱导,已获得一批荷花四倍体品系,用四倍体与二倍体杂交,又选出一批三倍体品系。这些荷花花瓣宽厚,花朵增大,色艳,开花时花朵不完全开放,别具姿色。现今菊花(dendranthema×grandiflorum)、月季(rosahybrida)、郁金香(tulipagesneriana)、百日草(zinniaelegans)、大丽花(dahliahybrida)等著名品种也几乎都是多倍体[9]。
黄济明(1983)在百合的诱导试验中,得到的多倍体百合植株具有花大、粗壮、耐贮藏运输等优点。张教方等(1990)在诱导金鱼草(antirrhinummajusl.)的研究中,结果表明,用浓度为0.3%~0.5%的秋水仙素溶液处理种子24h的效果较好,同时四倍体的金鱼草的花加大0.5~0.8倍,花瓣增厚、重瓣效果增强,可大大提高其观赏性。岳桦等(1992)以0.05%的秋水仙素处理金鱼草红色品种48h诱变率为36%,诱变获得的多倍体金鱼草显著增大,长平均增大25%,宽平均增大20.3%,雄蕊瓣化,重瓣效果显著。1995年,杜仙明等利用二倍体矮脚白小白菜经秋水仙